中文名：HMGB-1 elisa試劑盒

規  格：48t/96t

保  存：2~8℃

有效期：6個月

樣  本：血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。

特  點：敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩定、易保存，操作簡便。

用  途：用于測定血清，血漿及相關液體樣本中相關含量或活性。

操作步驟：

產品僅用于科研實驗開始前，請提前配置好所有試劑，試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。

1. 加樣：分別設空白孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔加待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加辣根過氧化物酶標記抗小鼠IgG工作液

100μl（取1μl生物-素標記抗體加99μl生物-素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制），37℃，60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。

4. 依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見孔內有明顯藍色，即可終止）。

5. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應（此時藍色立轉）。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。

6. 用酶標儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測。

注意事項：

1.  此試劑為體外檢測試劑，效期內使用，試劑應視為傳染物，不同總批號的試劑不能混用。

2． 使用前應將盒內各試劑取出。室溫放置至少30分鐘，

3． 濃縮洗滌液出現結晶后，請于37℃孵育15分鐘。

4． 濃縮樣品稀釋液出現結晶后，請于37℃孵育15分鐘

5． 若24小時內進行實驗，標本可存放于2～8℃。不需及時實驗，標本-20℃保存，避免反復凍融。

6． 在反復清洗微孔板，并扣干微孔中的殘余液體，否則將降低精que度，造成吸光度偏離的假像。

7． 加樣完畢后，應注意輕微搖動微孔反應條，以便使孔中的液體充分混勻。

8． 試劑盒保存于2～8℃，請勿冷凍，有效期請見盒內標示。

標本中抗體量越多，結合在固相上的酶標抗體愈少，顏色越淺，顏色的深淺和樣品中的HMGB-1含量呈負相關，采用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度（OD 值），根據標準曲線，計算測試樣品中HMGB-1濃度。

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